Sidney Bristow (Jennifer Garner) je mladá tajná agentka s atletickou postavou, která pracuje pro SD-6. Sydney brzy pochopí, že SD-6 není vládní organizací, ale tajnou spojkou širší sítě, která pracuje proti USA. Touha po pomstě ji dovede do CIA, kde nabídne pomoc. Její spojkou v CIA je agent Michael Vaughn. V SD-6 pracuje i otec Sydney, Jack Bristow, který je také dvojtým agentem CIA. Sydney podstupuje smrtelná dobrodružství a v různých částech světa plní úkoly, na které by si netroufl ani muž.